干燥培养基制作中常见问题的解决

经验交流T燥培养基制作中常问的解决王赞信，朱敏浙江省疾病预防控制中心。杭州310009中分类号Kl文献标识码目前，市售的商品干燥培养基除了进口培养基如，1上公司的产品质。！比较稳记。国内有些厂家生产质量将直接影响微生物检验结果，因此。如何调整配方，选用优质的培养基原材料，使培养基质量趋于稳定。是每个培养基生产厂家必须研宄的课。我们在实际工作中发现在干燥培养基制作中。如果照搬国家标准2提供的配方。投料生产的培养基质量往往达不到要求。主要原因是所用原材料质量参差不齐，有些原料质量较差，只有对原配方进行认真研宄和调整。才能提高产品质量。本文介绍了我们在几种干燥培养基制作中发现的问及解决方法，营养液体培养基此类产品主要有营养肉汤普通肉汤肉汤。液，菌浪等。其。1贡控要求先足透明度和；晰度要好，无混浊及沉淀物。细菌生长良好，实际制作中。国产原材料优劣不，有些厂家提供的蛋白胨牛肉粉酵母粉的质量较差。不是出现混浊，就是有沉淀。尤其遇有磷酸盐成分时更为明显。解决办法首要的就是加强质量控制。选择优质的原材料。目前国内不少厂家生产的原材料质量均较好。譬如北京华都的牛肉胨上海卢潮港的细菌胨，北京联利与浙江富阳的酵母粉等。这些原材料的共同特点是水溶性好无混池和沉淀现象。营养成分较高。
营养固体培养基此类产品包括营养琼脂普通琼脂。血琼脂基础等。除了对营养成分要求较高外，琼脂粉的质量也不容忽视。在实际制作中。我们发现用胶州琼脂粉制作的营奉琼脂。凝固后特别是放置冰箱过夜后重新溶化比较困难。隔水煮沸几乎不能化开。用户意较大。经反复调试。发现胶州琼脂由于其生产原料为石花菜。虽然其透明。清晰度均不错，但凝固温度低。起溶点较高。改用浙江洞头的琼脂粉，就可获得较满意的效果。另外由于营养琼脂是基础培养基，用量较大。质控方面。要求达到较高的灵敏度，营养要求高，其中所用蛋白胨的质量至关重要，直接影响成品质量；鉴于蛋白胨生产厂家不同，就是同厂家不同批号的蛋白胨质量也会有差异，营养琼脂的质量往往会有波动。有资料3认为，如在原配方中添加0050赖氨酸和，蛋氨酸蛋白胨可相应减少。由此制作成的营养琼脂质量很稳定，这有待进步摸索，氯化镁孔雀绿增菌液培养基此培养基容易出现的问误。如果采用4的氯化镁。无机离子的渗透压将高出生理渗透压的倍多。我们建议将氯化镁用量改成2左右，同时改用蛋白胨为进口胨。这样虽然制作成本有所升高，增菌效果则要好得多。也不会出现沉淀现象。
乳糖胆盐发酵培养基胆盐的选择十分重要，应加强胆盐原料的质检。猪胆盐和牛胆盐两种胆盐对金葡菌的抑制均不很理想，靠提高用量往往达不到要求。根据枸橼酸盐能促进胆盐的溶解性和增强抑制性，建议在原方中增加201枸橼酸钠。有时发现溴甲酚紫颜色性较差，发酵后颜色不够黄，可在配方中，加酚红。用量为溴甲酚紫的分之，就会有明显改进。
88琼脂按常方用麻胨配制，但国内缺货。我们选用优质蛋白胨代替。其不足之处是菌落返碱太快。其次是志贺氏菌1型容易生长为红色菌落，可以适当减少枸橡酸钠或添加0.1氯化镁。这问基本能解决。
目前。国产胆盐无法与进口奶3胆盐相比，要制作优质琼脂比较困难。武汉胆盐对大肠杆菌的抑制性较强另方面对志贺氏菌宋内氏菌毒性也里菌落小而变红平板面容易出现油脂物。益阳牛胆盐对志贺氏菌毒性是低。但对大肠杆菌的抑制性较差。且菌落红颜色不够明显。并有扩散现象。在实际应用中我们选用混合胆盐。相互取长补短。基本可以解决以上存在的问。
胆盐的用量不能照搬原方，应根据不同材料的质量进行调整。以达到质控指标为准，过高过低均不妥。尤其志贺氏菌宋内氏菌伤寒杆菌敏感，混合胆盐应选用4 5左右量为妥，4琼脂是霍乱弧菌检测用的专用培养基，其质量好坏直接影响病原菌的检出。关系到霍乱流行病学的防制。应引起足眵的，樱，门囵溘悱般的。贡找要求1.1化；分女透明度色泽等与常规培养基相同。制成的平面应无油脂物；2亚碲酸钾还原性要好；3.对大肠杆菌和副溶血性弧菌抑制性强。基本不生长；4霍乱弧菌的菌落大小36，24应达到25左仨；5.乱弧菌生长4听，以上在配方调试过程中我们发现1.原方不加酵母粉对小型霍乱弧菌生长有影响。菌落较小，在20，以下，而加入适量酵母粉后。各型霍乱弧菌生长良好。菌落均可达25左右。2按原方十烷基硫酸钠05利凡诺0031若庆欠霉素用量按原方量。则抑制性太强，菌落偏小。经调试。十烷基用量提高到1.0左右，同时将利凡诺减少至0 021左右。庆大霉素用量才能按原方量，同时对副溶血性弧菌有大的抑制性，36，以上基本不生长。3.该方容易在平面出现油脂物，经过实验我们认为与枸橼酸盐用量有密切关系。如奶氏亍9024内七观汕胎物；言，2不出现油脂物；而用101基本上无油脂物。但对霍乱弧菌的菌落大小有些影响。确定9.5较适宜。44琼脂平上，1溶血性弧菌的生长与培养温度有定关系。置35，以下容易生长。36，易受抑制；同时亚碲酸钾还原后者比前者要明显，因此，似乎4琼脂的适宜培养温度以36，为妥，但这与质控规定35，有矛盾。5.使用紫菜或石花菜等不同原料制成的琼脂粉对于霍乱弧菌的生长也有定影响。但其原因及作用机理有待进步摸索。另外，实际应用中仍有不少用户反映该方对杂菌的抑制较差，尚待进步的研宄。
近年。随着市场经济的不断发展，商品培养基的使用越来越广泛。对各类培养基的质量要求也越来越高。从营养要求。1长辅助闪户。抑制，刊心剂的选好1毖响；方面有很多工作可做，有待于今后进步摸索，使我们的国产培养基质量逐渐提高，能与国外产品相媲美。
l钦升周正明。高屹等。实用医学培养培养基手册。北京收稿日期2002