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机械溶血试验是什么?
机械溶血试验是一种用来检测红细胞膜的稳定性以及抗溶血能力的实验。通过机器或手工将样本中的红细胞受到不同程度的振动、压力和切割等,来观察红细胞的抵抗能力。
机械溶血试验需要哪些设备和试剂?
进行机械溶血试验需要以下设备和试剂:
离心管和离心机 生理盐水 洗涤缓冲液(PBS) 1%牛血清白蛋白(BSA) 0.9%NaCl双倍稀释液 不同规格孔径的器具(例如玻璃珠、硅胶珠、振荡器等) 分光计或比色计等检测设备如何进行机械溶血试验?
具体步骤如下:
收集血样:采血时需要注意,要用无菌技术进行采样,以避免污染。 制备红细胞悬液:将采集到的血样放入离心管中,并加入等体积的PBS溶液。离心5-10分钟后,取出上清液(血浆)。 洗涤红细胞:加入等体积的PBS溶液,并离心5-10分钟。去掉上清液和沉淀,重复2次以上的洗涤步骤。 制备不同浓度悬液:将洗好的红细胞加入1%BSA含量的PBS缓冲液中,制成一定浓度(如3%、6%、9%等)的红细胞悬液。 操作机械溶血器具:将红细胞悬液放入机器内或手工进行处理。可以用不同规格孔径的玻璃珠、硅胶珠、振荡器等进行处理。每个处理时间可设置为5秒至5分钟不等。同时,在空白对照组中也进行相应时间和规格下机器操作。 离心:将处理后的红细胞悬液离心10分钟,去掉上清液。 检测溶血率:将沉淀物加入等体积的NaCl双倍稀释液中,并进行分光计或比色计等检测设备进行检测。通过比较空白对照组和实验组的吸光度值,计算溶血率。机械溶血试验需要注意哪些问题?
在进行机械溶血试验时,需要注意以下问题:
血样采集应严格按照无菌技术操作; 红细胞洗涤次数不宜过多,以免影响红细胞质量; 制备不同浓度悬液和处理时间需要经过实验验证确定; 离心时需要避免过度离心,以免对红细胞造成损伤; 实验结果应与空白对照组进行比较,以减少误差。机械溶血试验是一种简单易行、可重复性好的实验方法,可以用于检测红细胞膜的稳定性和抗溶血能力。在临床和科研领域中有广泛应用,对于一些与溶血相关的疾病的诊断和治疗具有重要意义。