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将离心并过滤收集的工程藻藻糊均匀地铺于洁净的塑料薄膜上,用电风扇吹干。干透的藻片立即收集保存于密闭容器中,置于避光处。工程藻的干燥及贮存大量培养的工程藻生长至颜色蓝绿色(对数期)时即可离心收集。在夏天25e左右时,藻糊一般4860h即可成干藻片。干藻片颜色呈淡绿或深绿色。保存干藻片的容器要密闭,否则藻片易潮解、发霉或虫蛀等。干藻片贮存3年后,除了颜色稍淡些,未见明显变质。
贮存工程藻的复苏藻片接入培养液1d后即可明显看到培养液变绿,但贮存时间长的藻片培养液变绿的速度慢,且培养液底部出现棕黄色已死亡的藻丝和藻细胞。取绿藻液在显微镜下观察,藻丝生长及发育正常。结果显示,尽管贮存的工程藻随时间增加其中少部分工程藻出现死亡现象,影响了其杀蚊幼活性。贮存3年以上的工程藻在10个/ml数量级时也能杀死部分蚊幼虫。同时3种转基因工程藻之间杀蚊幼效果差异无显著性。
基因工程产品其穿梭质粒的稳定遗传非常重要,而蓝藻质粒的稳定遗传是其特性之一。我们的研究中,工程藻干燥后贮存3年以上再复苏,仍具有杀蚊活性,穿梭质粒保持着较高水平的表达,这进一步证明了蓝藻质粒的稳定遗传。在干燥方法上选择电风扇吹干且注意干透,以防发霉、变质,取得了满意结果;而选择电烤箱烤干,由于未掌握好烤箱温度及烘烤时间,破坏了藻细胞的生物学活性,因而复苏效果不理想。虽然干燥贮存的工程藻灭蚊所需浓度高于新鲜培养的藻液,但由于其比藻液更易保存、运输和商品化,因而具有更大的推广应用价值。