快速干燥对黄皮胚轴贮藏寿命及抗氧化酶活性的影响

快速干燥对黄皮胚轴贮藏寿命及抗氧化酶活性的影响，贤进宋松泉1mw蒋昌1薄家瑞，大子基因工程教部重点实验室与生命科学学院，广州5275；2怀化学院生物系怀化41如，8对胚轴贮藏寿命的影响及与抗氧化薛活性的关系未经脱水的胚轴在15.，贮藏128仍具有较高的存活率和活力指数。快速脱水1.5和3，1后胚轴的存活率，活力相数并未因脱水而下降。但它们在15.贮藏的寿命分，只有8和21未经阮水2轴的抗，化酶8，以丁活性在贮藏过程中能较好地保持，但经快速阮水后其抗氧化酶活性在1藏过程中则迅速下降，脱水时间越长，酶活性在，藏过程中的下降就越快。
性。顽拗性秒子。生活力顽恸性种挪。1她附1迎常对脱水和低温每感种质资源保存十分困难。超低温保存被认为是种质资源保存的，效和经济的方法。但由于顽拗性种子水分含，过高，超低温处埋容易导致结冰伤害，故也难以应用，门从发现快速脱水能明！地降低顽拗性种子，尤其是离体胚轴的致死水分量后6，止等1993；310你1.等1992，就设想通过快速干燥将离体的顽拗性种子胚轴的含水景降得较低后。再将其置于液氮中。以实现其种质资源的长期保存，199王晓峰和傅家瑞1994黄雪梅2000.但这些努力均未取得实质性的进展。因此，有必要对其在快速脱水下胚轴致死含水景降低的机，及快速脱水后活力的保持情况进亍研黄皮足种典型的顽拗性种子宋松泉和傅家瑞992，997，前文伍贤进；21己经证明快速干燥的芮皮胚轴能在较低的含水清下保持活力不变，这与快速干燥缩短了在中间含水量下发生的膜，幻山狱间和保持较高的。00和01活性有关。但经快速脱水的胚轴的活力和抗氧化活忱能否保持尚待研宄，本文进步研究快速干燥对黄皮胚轴贮藏寿命的影响及与抗氧化酶活性变化的关系。
1材料与方法3按前文伍贤进2001.方法剥离胚轴和快速脱水打3817，0对照1.53含水量分别为。920.24和0.4，后置于培养直径为6，中，用封口膜密封后于15恒温保存，1.2胚轴活力。电解质渗漏速率。含水量。抗氧化酶活性和蛋白质含量测定2结果2.1胚轴经快速脱水后在5藏过程中活力的变化刚结束脱水时，藏，办胚轴存活率和活力指数高于未脱水1前的水平。似在贮藏过程中的变化却差异明显脱水的，间越长。胚轴在贮藏过程中存活率和活力指数的4降就越快，1藏寿命就越短1.2.朱脱水0胚轴在藏过程中存活率缓慢降低，贮藏128 4后仍保持较高的存活率。活力，女在贮藏前期641内打所增加，然后再逐步下降12.脱水1.5胚轴的长寿命为84存活率和活力指数保持不变的时间是1山脱水3胚轴的长寿命则为2存活率保持不变的时间小于121但活力指数在贮藏18内还略有增加，随后再迅速降低12.
藏过程中脱水不同，间胚轴的电解质渗漏速率变化明显不4未脱水胚轴01在5藏的0324内逐步降低，以后则随贮藏时间的延长而增加3.脱水1.5和3.0胚轴在贮藏开始后加时期与存活率迅速降低的时期相致。脱水时间愈长，在贮藏过程中电解质渗漏速率达到大值性的变化渗漏速率的变化2.2胚轴经快速脱水后在贮藏过程中80000和0人1活性的变化经不同，间快速脱水的胚轴在贮藏过程中3000，活性的变化明显不同。未脱水胚轴□301的501活性在贮藏的0161内迅速地降低。以6下降变缓。321左心后则随1藏时间延长而行所提高4.快速脱水1.51胚轴数的变化300活性在贮藏过程中经历了降低升高降低贮藏过枵中从开始就迅速下降4.
未脱水胚轴师0的，00活性在贮藏过程中基本呈上升趋势，尤其在贮藏321后迅速增加5.快速脱水1.51轴的活性随藏时的延长逐步降低而快速脱水31胚轴的扣活性在贮藏迅速地降低阁5.
性的变化经快速脱水不同时间后胚轴的丁酶活性在贝士藏过程中的变化与300酶有许多相似之处。未脱水胚轴001除了在贮藏的032内有少量升降变化外。以后则打较大的升高并能较好地保持阁6.快速脱水。5胚轴，活性在贮藏的0 23内有定程度的升高，以后则随贮藏而逐渐下降；但快速脱水3.0胚轴的，吮1活性则在贮藏过程中迅速降低6.
3讨论快速脱水1.5和3.0黄皮胚轴的存活率和活力指数贮藏01时高于未脱水0，前的水平这与前文的结果致贤迸性的变化活力的保持差异却很大，说明了不同时间的快速脱7欠对胚轴伤苫不同，这种伤害及其差异在脱水结束时测定的电解质渗漏速率的大小上也得到了反映3.屯解质渗漏速率的大小反映了质膜受损伤胚轴的电解质渗漏速率在脱水和随后贮藏过程中的增加，说明了其膜结构和功能在脱水和贮藏过程中被破坏，脱水时间越长，破坏就越快3.
已有研宄明，抗氧化系统的活性下降以及脂质过氧化作用加强是种了劣变的主要原。；0 1999，脱水使顽拗性种子活力降低的主要原因之是自由银伤害和膜脂过氧化作宋松泉和傅冢瑞1997，5，1琴和1.1999，31和80止1995.快速脱水1.5和3.0的黄皮胚轴的9圯只和，活性贮藏，1时高于脱水前乃，1的水平，但它们在贮藏过程中却迅速地降低，而几脱水，间越长，贮藏，的降就越快46.
这说明黄皮胚轴抗，化酶活性在脱水程度较轻时的增加伍贤进等2001只是个适应性保卫反应，其保持的时间较短，对胚轴活力的长时间保存意义有限。未脱水胚轴0在贮藏过程中活力和抗等200但快速脱水不同时间的胚轴在贮藏中氧化酶活性的变化趋势，反映了老化历程。快速脱水1.51胚轴的抗闱化酶活性在贮藏过程中经历了降低升高降低的变化过程根据黄皮胚轴抗氧化酶话性随活力变化的特点宋松泉和博家瑞1997.伍贤进等200可以判断这与未脱水胚轴的抗氧化酶活性在5藏中的变化过程相似只是未脱7尺胚轴尚未贮藏到存活率为0故抗氧化酶活性的后降低过程尚未现。未脱水胚轴抗氧化酶活性在藏前期的降低与胚轴活力变化的关系不人，可能是抗氧化酶对1藏的较低温度的种适应性反应；它们随着贮藏时间加长的升高则可能是胚轴在老化时的应激保护性反应。抗氧化酶能清除自由基防止膜脂过氧化，延缓种子的劣变。因此，其活性在藏时的保持时间直接影响胚轴的藏寿命。快速脱水后黄皮胚轴的抗氧化酶活性在5藏过程中的保持时间较未脱水的短得多，胚轴的5藏寿命势必缩短。而且快速脱水3.0胚轴的抗氧化酶活性在贮藏中几乎从开始就迅速下降，明这时细胞的生理特点己发生了较大改变，抗氧化酶活性火力正常的适应和应激性的保卫反应，肠轴，快速脱水不仅能破坏细胞膜的结构和功能，而且还能改殳细胞的生理状态。加快抗氧化酶等细胞伤害保护机制的失效，从而降低了胚轴的贮藏寿命。因此，试通过快速脱水来降低顽拗性种子或离体胚轴的致死含水量，以避免其在超低温保存，发生结冰伤1.前很难达到种质资源长期保存的目的。
7，1印1进1中山大学博士学位论文缶，忙史，1士忙此